Produktai

LecA (PA-IL) yra citotoksinis lektinas ir adhezinas, kurį gamina Pseudomonas aeruginosa, kuris suriša hidrofobinius galaktozidus su dideliu specifiškumu ir afinitetu.Naudodami lecA-egfp transliacijos sintezę ir bioplėvelės ekstraląstelinės matricos imunoblotinę analizę, parodome, kad lecA yra ekspresuojamas bioplėvelėje išaugintose ląstelėse.Atliekant statinius bioplėvelės tyrimus su polistirenu ir nerūdijančiu plienu, bioplėvelės gylis ir paviršiaus padengimas sumažėjo dėl lecA mutacijos ir pagerėjo LecA per daug gaminančioje padermėje PAO-P47.Bioplėvelės paviršiaus padengimą pirminiu padermiu PAO-P47, bet ne lecA mutantu ant plieninių kuponų, taip pat slopino augimas esant arba izopropil-beta-D-tiogalaktozidui (IPTG) arba p-nitrofenil-alfa-D-galaktozidui ( NPG).Be to, subrendusios laukinio tipo bioplėvelės, susidarančios nesant šių hidrofobinių galaktozidų, gali būti išsklaidytos pridedant IPTG.Priešingai, p-nitrofenil-alfa-L-fukozės (NPF), turinčios didelį afinitetą P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lektinams, pridėjimas neturėjo įtakos bioplėvelės susidarymui ar sklaidai.P. aeruginosa PAO1 planktoniniam augimui įtakos neturėjo IPTG, NPG ar NPF, taip pat padermė negalėjo panaudoti šių cukrų kaip anglies šaltinių, o tai rodo, kad pastebėtas poveikis bioplėvelės susidarymui atsirado dėl konkurencinio LecA ligando slopinimo. privalomas.Panašūs rezultatai taip pat gauti naudojant bioplėveles, auginamas dinamiškomis tekėjimo sąlygomis ant plieninių kuponų, o tai rodo, kad LecA prisideda prie P. aeruginosa bioplėvelės architektūros skirtingomis aplinkos sąlygomis.

Arabidopsis augalų lapuose aptikta alfa-L-fukozidazė (EC 3.2.1.51), galinti atpalaiduoti t-fukozilo liekaną iš ksilogliukano oligosacharidų šoninės grandinės.Be to, alfa-L-fukozidazė, turinti panašų substrato specifiškumą, buvo išgryninta iš kopūstų (Brassica oleracea) lapų, kad būtų sukurta viena juosta SDS-PAGE.Iš šios baltymų juostos buvo gautos dvi peptidų sekos, kurios buvo naudojamos Arabidopsis genui, koduojančiam alfa-fukozidazę, kurį siūlome vadinti AtFXG1, identifikuoti.Be to, taip pat buvo rastas Arabidopsis genas, turintis homologiją su žinomomis alfa-L-fukozidazėmis, ir mes pasiūlėme jį pavadinti AtFUC1.Tiek AtFXG1, tiek ATFUC1 buvo heterologiškai ekspresuojami Pichia pastoris ląstelėse, o alfa-L-fukozidazės aktyvumas išskiriamas į auginimo terpę.AtFXG1 koduota alfa-L-fukozidazė buvo aktyvi prieš oligosacharidus iš ksilogliukano XXFG, taip pat prieš 2'-fukozil-laktitolį, bet ne prieš p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranozidą.Tačiau heterologiškai išreikštas AtFUC1 buvo aktyvus tik prieš 2'-fukozillaktitolį.Taigi pirmasis turi būti susijęs su ksilogliukano metabolizmu.