Produktai

CTP: fosfocholino citidiltransferazė α (CCTα) yra branduolinis fermentas, katalizuojantis greitį ribojantį CDP-cholino fosfatidilcholino (PC) sintezės etapą.CCTα lipidų aktyvinimas sukelia jo perkėlimą į branduolio apvalkalą ir intrabranduolinės membranos tinklo, vadinamo nukleoplazminiu tinkleliu (NR), išplėtimą mechanizmu, apimančiu membranos deformaciją.Branduoliniai laminai taip pat reikalingi NR stabilumui ir platinimui, tačiau nežinoma, ar ši unikali struktūra ar branduolinė lamina apskritai reikalinga PC sintezei.Norint ištirti šį ryšį, branduolinę sluoksnį išeikvoja RNR arba sutrikdė Hutchinson-Gilford progerijos sindromo (HGPS) mutanto laminatas A (progerinas), ir buvo analizuojamas poveikis CCTα ir cholino metabolizmui.siRNR sukeltas lamino A / C arba lamino B1 nutildymas CHO ląstelėse, siekiant sumažinti NR, neturėjo įtakos PC sintezei, o dvigubas numušimas nespecifiškai slopino šį kelią.Patvirtindamas nedidelį jo vaidmenį PC sintezėje, NR buvo aptikta tik 10% laikinai pernelyg išreikštos cholino / etanolamino fosfotransferazės.CHO ląstelėse CCTα buvo nukleoplazminis ir lokalizuotas kartu su GFP-progerinu branduolio raukšlėse ir invaginacijose;tačiau HGPS fibroblastai parodė nenormalų CCTα pasiskirstymą citoplazmoje ir branduolio apvalkale, kurį lydėjo 2 kartus sumažinta PC sintezė.Nepaisant pakitusios lokalizacijos, cholino žymėjimo eksperimentai parodė, kad CCT aktyvumas nebuvo paveiktas, o PC sintezės slopinimas buvo atsektas dėl sumažėjusio hemicholiniui jautraus cholino transporterio aktyvumo.Darome išvadą, kad CCTα ir laminai konkrečiai bendradarbiauja, kad sudarytų NR, tačiau bendra branduolio apvalkalo struktūra turi minimalų poveikį CCT aktyvumui ir PC sintezei.