Produktai

Dėl oksidacinio DNR bazių pažeidimo dažniausiai susidaro oksiduoti purinai, ypač 7,8-dihidro-8-oksoguaninas (8-oksoG) ir 7,8-dihidro-8-oksoadeninas (8-oksoA), o pirmasis yra žinomas mutageninis pažeidimas.Kadangi 8-oksoG, palyginti su įprastomis bazėmis, yra lengvai toliau oksiduojamas, bazės įterpimas DNR sintezės metu priešingai oksiduotai 8-oksoG formai buvo tiriamas in vitro.Sintetinis šablonas, turintis vieną 8-oksoG pažeidimą, pirmiausia buvo apdorotas skirtingais vieno elektrono oksidatoriais arba vienkartinėmis deguonies sąlygomis, o po to pradėtas pratęsti, katalizuojamas Klenow fragmento egzo- (Kf exo-), veršelio užkrūčio liaukos DNR polimerazės alfa (pol alfa) ) arba žmogaus DNR polimerazės beta (pol beta).Remiantis ankstesnėmis ataskaitomis, dAMP ir dCMP yra įterpiami selektyviai priešais 8-oksoG su visomis trimis DNR polimerazėmis.Įdomu tai, kad buvo nustatyta, kad 8-oksoG oksidacija sukelia dAMP ir dGMP įterpimą priešais pažeidimą Kf exo-, laikinai slopindamas pradmenų pratęsimą, atsirandantį modifikuotos bazės vietoje.Be to, pažeidimas blokuoja DNR sintezę pol alfa ir pol beta.Eksperimentai su 8-oksoA modifikuotu šabloniniu oligonukleotidu rodo, kad ir 8-oksoA, ir oksiduota 8-oksoA forma tiesiogiai įterpia dTMP Kf exo-.8-oksoG turinčių oligonukleotidų masės spektrometrinė analizė prieš ir po oksidacijos IrCl62 atitinka pirmiausia 8-oksoG vietos oksidaciją, todėl susidaro guanidinohidantoino dalis kaip pagrindinis produktas.Nebuvo gauta jokių abazinių vietų susidarymo įrodymų.Šie rezultatai rodo, kad oksiduota 8-oksoG forma, galbūt guanidinohidantoinas, gali nukreipti klaidingą dNTP skaitymą ir įterpimą DNR sintezės metu.Jei toks procesas vyktų in vivo, tai būtų taškinis mutageninis pažeidimas, vedantis į G-->T ir G-->C transversijas.Tačiau atitinkama oksiduota 8-oksoA forma pirmiausia rodo teisingą T įterpimą DNR sintezės metu su Kf exo-.