Produktai

Šiame tyrime aprašomas paprastas ir efektyvus metodas, naudojant didelio efektyvumo skysčių chromatografiją (HPLC), susietą su fluorescenciniu aptikimu, siekiant nustatyti glutamato įsisavinimo nerviniame audinyje kinetinius parametrus.Tinklainės audinys, gautas iš 7 dienų jauniklių, buvo inkubuojamas su žinomos koncentracijos glutamatu (50-2000 μM) 10 min., ir buvo išmatuotas o-ftaldehido (OPA) darinio neuromediatoriaus lygis inkubacinėje terpėje.Įvertinus skirtumą tarp pradinės ir galutinės glutamato koncentracijų terpėje, buvo apibūdintas įsotinimo sugerties mechanizmas (K(m)=8,2 ir V(max)=9,8 nmol/mg baltymo/min.).Ši priemonė daugiausia priklausė nuo natrio ir temperatūros, tvirtai patvirtindama, kad koncentracijos mažinimo mechanizmą iš tikrųjų įsisavina didelio afiniteto transporteriai.Be to, mūsų rezultatai taip pat parodė, kad cinko chloridas (glutamato / aspartato pernešėjų inhibitorius) sukėlė nuo koncentracijos priklausomą glutamo pasisavinimo sumažėjimą, parodydamas mūsų metodikos specifiškumą.Apskritai, šis darbas apibūdina alternatyvią metodiką, leidžiančią įvertinti glutamato įsisavinimą nerviniame audinyje naudojant HPLC.Šis metodas galėtų būti svarbi priemonė tyrimams, susijusiems su nedidelių glutamato transportavimo pokyčių, susijusių su centrinės nervų sistemos pažeidimu, apibūdinimu.