ONPG CAS:369-07-3 98,0 % nuo baltos iki beveik baltos spalvos milteliai
| Katalogo numeris | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| produkto pavadinimas | ONPG (2-nitrofenil-beta-D-galaktopiranozidas) |
| Molekulinė formulė | C12H15NO8 |
| Molekulinė masė | 301.25 |
| Išsami informacija apie saugojimą | 2–8 °C |
| Suderintas tarifų kodeksas | 29 400 000 |
Produkto Aprašymas
| Grynumas (HPLC) | Min.98,0 % |
| Išvaizda | Balti arba beveik balti milteliai |
| Sprendimas(1% vandenyje) | Skaidrus, bespalvis arba gelsvas tirpalas |
| Vandens Turinys(Karlas Fisheris) | Maks.0,5 % |
| Savitasis optinis sukimasis [α]D20 (c=1, H2O) | -65,0 °C iki -73,0 °C |
Diskusija apie ONPG testą (β-galaktozidazės testas)
Pastaruoju metu dažnai kyla klausimų: 1. Kodėl ONPG testu galima atskirti uždelstą laktozės fermentaciją?2. Kodėl nacionaliniame standarte nurodyta, kad ONPG tyrimui būtina naudoti 3 % natrio chlorido trisacharidinę geležį (arba trisacharidinę geležį)?3. Kodėl atliekant OPNG testą Vibrio parahaemolyticus reikia lašinti tolueną pagal standartą?Kas yra funkcija?
Mūsų įmonė peržiūrėjo daug informacijos, ją apibendrino ir pasidalino su jumis žemiau:
Principas: kiniškas ONPG pavadinimas yra o-nitrobenzen-β-D-galaktopiranozidas.ONPG gali būti hidrolizuojamas į galaktozę ir geltonąjį o-nitrofenolį (ONP), veikiant β-galaktozidazei, todėl β-galaktozidazės aktyvumą galima nustatyti keičiant auginimo terpės spalvą.
Laktozė yra cukrus, kurį turi aptikti dauguma mikroorganizmų.Jo metabolizmui reikalingi du fermentai, vienas yra ląstelių permeazė, laktozė patenka į ląsteles veikiant permeazei;kita yra β-galaktozidazė, kuri hidrolizuoja laktozę į galaktozę.Laktozė ir gliukozė.β-galaktozidazė taip pat gali tiesiogiai veikti ONPG, kad hidrolizuotų ją į galaktozę ir geltonąjį o-nitrofenolį (ONP).Tai galima padaryti per 24 valandas, net ir naudojant laktozės atidėtą fermentaciją.Todėl jame paaiškinami stebėjimo rezultatai, kai 1 kultūra buvo paimta iš pasvirusios agaro ir sėjama visu ratu 36 °C temperatūroje 1–3 valandas ir 24 valandas.Jei gaminasi β-galaktozidazė, ji pagelsta per 1-3h, jei tokio fermento nėra, per 24h nepakeis spalvos.
Pagal pirmiau minėtus du fermentus mikroorganizmus galima suskirstyti į šias kategorijas:
1 laktozę fermentuojanti (18-24 val.) bakterija su permeaze ir β-galaktozidaze P + G +;
2 Atidėtos laktozės fermentatoriai (užtrunka ilgiau nei 24 valandas), neturintys pralaidumo, bet turintys galaktozidazės: P-G+.
3 Nelaktozės fermentatoriai, kuriuose trūksta permeazės ir galaktozidazės: P-G-.
ONPG testą galima naudoti norint atskirti laktozės atsilikimą fermentuojančias bakterijas (P-G+) nuo nefermentuojančių laktozės bakterijų (PG-), pavyzdžiui:
1 Atskirkite vėlyvuosius laktozės fermentatorius (P-G+) nuo nelaktozės fermentatorių (P-G-).
a) Citrobacter (+) ir Salmonella arizonae (+) iš Salmonella (-).
b) Escherichia coli (+) iš Shigella sonnei (-).
Kodėl ONPG tyrimas buvo atliktas naudojant vienos nakties kultūrą su 3% natrio chlorido geležies trisacharidu (geležies trisacharidu)?Mūsų įmonė susipažino su daugybe informacijos, tačiau nėra aiškaus pareiškimo.Tik FDA svetainėje rašoma, kad "Tiriamas kultūras pasėkite ant trigubo cukraus geležies agaro įstrižainių ir inkubuokite 18 h 37°C temperatūroje (arba kitoje tinkamoje temperatūroje, jei reikia). Maistinės (ar kitos) agaro įstrižos, kuriose yra 1,0 Taip pat galima naudoti % laktozės.reiškia: bandomos bakterijos buvo pasėtos trisacharidinėje geležies terpėje ir kultivuojamos 37 °C temperatūroje 18 valandų.Taip pat priimtina maistinė agaro (arba kita) terpė, kurioje yra 1 % laktozės.Todėl daroma išvada, kad trisacharido geležies terpėje yra laktozės.Po naktinio augimo bakterijos gamina gerą aktyvią β-galaktozidazę.Naudojant tokias bakterijas, ONPG gali greičiau suskaidyti β-galaktozidaze.Eksperimentinis reiškinys greičiau ir geriau pasireiškia.Be to, norint visiškai išlaisvinti β-galaktozidazę, lašinamas toluenas ir vandens vonia 5 minutes.
