Produktai

Mycobacterium tuberculosis žmogaus šeimininke gali išlikti dešimtmečius.Manoma, kad griežti atsako būdai, susiję su neorganiniu polifosfatu [poli(P)], kurį sintetina ir hidrolizuoja atitinkamai polifosfato kinaze (PPK) ir egzopolifosfataze (PPX), atlieka pagrindinį reguliavimo vaidmenį bakterijų išlikimui.Čia parodome, kad M. tuberculosis poli(P) kaupimasis yra laikinai susijęs su bakterijų augimo apribojimu.Taip pat identifikuojame M. tuberculosis Rv1026 kaip naują egzopolifosfatazę, pasižyminčią hidroliziniu aktyvumu prieš ilgos grandinės poli(P).Naudodami tetraciklino indukuojamą ekspresijos sistemą, kad sumažintume Rv1026 (ppx2) ekspresiją, mes nustatėme, kad M. tuberculosis poly(P) kaupimasis sulėtina augimą ir sumažina jautrumą izoniazidui, padidina atsparumą karščiui ir rūgštiniam pH bei padidina ląstelių išgyvenimą. makrofagų infekcijos metu.Atliekant perdavimo elektronų mikroskopiją, ppx2 numušimo padermė padidino ląstelės sienelės storį, o tai buvo susiję su sumažėjusiu ląstelės sienelės pralaidumu hidrofiliniams vaistams, o ne su vaistų ištekėjimo siurblių indukcija ar pakitusiu bioplėvelės susidarymu, palyginti su tuščio vektoriaus kontrole.Transkriptominė ir metabolominė analizė atskleidė metabolinį ppx2 numušimo poslinkį, kuriam būdinga sumažėjusi transkripcija ir transliacija bei glicerolio-3-fosfato lygio pokytis.Apibendrinant galima teigti, kad poli(P) vaidina svarbų vaidmenį stabdant M. tuberculosis augimą ir metabolizmo poslinkį ir prisideda prie tolerancijos antibiotikams dėl pakitusio ląstelės sienelės pralaidumo. Griežtas atsakas, apimantis reguliuojančias molekules neorganinį polifosfatą [poli(P)] ir (p). Manoma, kad )ppGpp tarpininkauja Mycobacterium tuberculosis išlikimui.Šiame tyrime mes nustatėme naują fermentą (Rv1026, PPX2), atsakingą už ilgos grandinės poli (P) hidrolizavimą.Genetiškai modifikuota M. tuberculosis padermė, kuriai trūksta ppx2 geno, padidino poli(P) lygį, kuris buvo susijęs su ankstyvu bakterijų augimo sustojimu ir sumažėjusiu jautrumu pirmos eilės vaistui izoniazidui, taip pat padidino bakterijų išgyvenamumą streso metu. sąlygomis ir makrofaguose.Palyginti su kontroline paderme, mutantas padidino ląstelės sienelės storį ir sumažino vaisto pralaidumą.Pasaulinė genų ekspresija ir metabolitų analizė atskleidė sumažėjusią transkripcijos ir transliacijos mechanizmų ekspresiją ir anglies šaltinio panaudojimo pokyčius.Apibendrinant galima pasakyti, kad poli(P) pusiausvyros reguliavimas yra labai svarbus M. tuberculosis patvarių formavimuisi.